▊产品介绍:
Y187[p53-His2+pGADT7]为转入质粒p53-His2和质粒pGADT7的Y187酵母菌,作为酵母单杂阴性对照菌株使用。
p53-His2 载体多克隆位点(MCS)插入了一个 p53 结合位点(consisting of 3 tandem copies of the p53 consensus binding sequence),将 GAL4 激活域-p53 融合蛋白(GAL4 AD-p53)与 p53 结合位点结合,可激活下游报告基因 HIS3 的表达。Y187[p53-His2+pGADT7]酵母中的 pGADT7 为空载体,不能与 p53 结合位点结合,也不能激活下游报告基因 HIS3 的表达,故作为阴性对照。
▊基本信息:
培养基: SD/-Leu/-Trp
菌株类别: 即用型酵母单杂阴性对照菌液
培养条件: 28-30℃,有氧
菌株的最佳3-AT浓度*: 50mM(SD/-His/-Leu/-Trp)
*注:在不同浓度(10mM,20mM,30mM,40mM,50mM,60mM,70mM,80mM)3-AT平板上,出现的酵母菌斑最少或者完全没有,即为最佳的3-AT浓度。
▊使用方法:
收到菌液及时四区划线活化,挑取单克隆在SD/-Leu/-Trp中培养到生长对数中后期加入终浓度30%无菌甘油保种,分装置于-80℃保存,避免反复化冻。建议超净台内划线涂板,避免杂菌污染。